Van de de Biologierang van GDSBio Kenmerkend Producten Moleculair de Proteïnasek Poeder In vitro PK N9016 100mg

Proteïnasek Poeder

Moleculaire Biologierang, voor Onderzoek slechts Gebruik

Cat No. N9016

Grootte: 100mg

Specifieke Activiteit: De proteïne van ≥30 U/mg

Vorm: Bevat proteïnase K (≥95%), gevriesdroogd poeder

Componenten

Opslag

geadviseerde -20ºC. De houdbaarheid van proteïnasek gevriesdroogd poeder is drie jaar wanneer opgeslagen verzegelde en droge onderstaande 4ºC. Wordt het proteïnasek gevriesdroogde poeder verscheept bij kamertemperatuur.

Beschrijving

De proteïnase K is een endolytic protease die peptide banden aan de carboxylic kanten van alifatische, aromatische of hydrophobic aminozuren splijt. De Proteïnase K is geclassificeerd als serine protease. Kleinste peptide dat door dit enzym moet worden gehydroliseerd is tetrapeptide.

Eigenschappen

• Recombinante proteïnase K

• Actief in een brede waaier van reactieproducten

Toepassingen

• Isolatie van genomic DNA van beschaafde cellen en weefsels

• Verwijdering van DNases en RNases wanneer het isoleren van DNA en RNA van weefsels of cellenvariëteiten

• Bepaling van enzymlocalisatie

• Het verbeteren van het klonen efficiency van PCR producten

Kwaliteitscontrole

DNase Activiteit: Niets opspoorbare enzymactiviteit na 6 urenincubatie met DNA λ bij 37ºC.

RN-aseactiviteit: Niets opspoorbare ribonucleaseactiviteit na 16 urenincubatie met RNA bij 25ºC.

Bron

Van gistcellen met gekloond gen die genetisch gebouwde Engyodontium-album (Tritirachium-album) coderen endolytic protease.

Molecuulgewicht

29.3 kDamonomeer.

Definitie van Activiteiteneenheid

Één eenheid van het enzym bevrijdt folin-Positieve aminozuren en peptides die aan 1 tyrosine µmol in 1 min bij 37°C, pH 7,5 beantwoorden gebruikend gedenatureerde hemoglobine als substraat.

De enzymactiviteit wordt geanalyseerd in het volgende mengsel: 0,08 m-kaliumfosfaat (pH 7,5), 5 m-ureum, 4 mm van NaCl, 3 mm CaCl₂ en 16,7 mg/ml hemoglobine.

Voorbereidingsinstructies

De voorraadoplossing kan als 40-80mg/ml in verdunningsbuffer [20 mm-tris-HCl (pH 7,4) worden voorbereid, 1 mm CaCl₂] of [20 mm-tris-HCl (pH 7,4), 1 Glycerol van mm CaCl_2, 2%-] worden gesteriliseerd en gebruikend 0.22μm filter bij definitieve concentratie van 20-40mg/ml in 50%-Glycerol worden geleverd. Opslag in gedeelten bij brede temperatuurwaaier van 24ºC aan -80ºC.

PES en PVDF-de membranen met lage eiwitband worden geadviseerd in steriele filtratie.

Remming en Inactivering

Inhibitors: De proteïnase K wordt niet buiten werking gesteld door metaalchelators, door thiol-reactieve reagentia of door specifieke trypsine en chymotrypsin inhibitors. Het Phenylmethylsulfonylfluoride en diisopropyl phosphorofluoridate verbieden volledig het enzym.

Buiten werking gesteld door bij 95°C 10 minuten te verwarmen.

Nota

• Optimale activiteit bij 50-55°C.

• De snelle denaturatie van enzym komt bij temperaturen boven 65°C. voor.

• De geadviseerde het werk concentratie voor Proteïnase K is 0.05-1 mg/ml. De activiteit van het enzym wordt bevorderd door 0.2-1% SDS of door 1-4 M ureum.

• Ca²⁺ beschermt Proteïnase K tegen autolyse, verhoogt de thermische stabiliteit en heeft een regelgevende functie voor de plaats van de substraatband van Proteinase K.

• Stal over een brede pH waaier: 4.0-12.5, optimale pH 7.5-8.0.

Dongsheng Biotech biedt verschillende reeks producten aan om u te helpen PCR succes bereiken. Voor enzymen, verstrekken onze Taq-Polymerase, HS Taq Polymerase van DNA, de Polymerase van DNA van FS Taq, Pfu-de Polymerase van DNA en de Polymerase van DNA van Fusiepfu hifi, efficiënt, gevoeligheidspcr prestaties. Wij hebben ook de Lange Taq-Polymerase van DNA voor lange PCR prestaties.