NGS-de Grootteselectie en Schoonmaakbeurt Magbeads van DNA van GDSPure van de Bibliotheekbouw

Productomschrijving

De Selectie Magbeads van GDSPuredna
Kat. Nr.: NC1011, NC1012, NC1013
 
Componenten

 
Opslag
Deze reagens zou bij 2-8°C. moeten worden gehouden. Bevries niet. De houdbaarheid is 2 jaar als ongeopend.
 
Beschrijving
Van de Selectiemagbeads van GDSPuredna het gebruiks krachtige super-paramagnetic parels en uitstekende bufferverhouding DNA-fragmenten van 150 bp nauwkeurig om te zuiveren en te selecteren aan 1000 bp of zelfs groter. De bovenmatige nucleotiden, zouten, enzymen en andere die onzuiverheden in de verrichting van DNA-bibliotheekbouw zullen worden de de geïntroduceerd na eenvoudig wasprocédé worden verwijderd, om gezuiverde fragmenten te verkrijgen, die direct in stroomafwaartse toepassingen zoals het rangschikken, kruising, PCR en enzymspijsvertering kunnen worden gebruikt. De Selectie Magbeads van GDSPuredna kan door hand en automatische formaten worden gebruikt.
 
Toepassing

Grootteselectie en schoonmaakbeurt voor volgende-Generatie het rangschikken (NGS), Sanger, qPCR, ddPCR en microarrays, enz. die rangschikken.
 

Het voorbereidende Werk vóór het Experiment

1. Wasoplossing: de ethylalcoholoplossing verse van 80% (V/V)

2. Eluent oplossing: nuclease-vrij water of TE Buffer

3. Draaikolk

4. Magnetisch rek

5. om de nauwkeurigheid van de selecterende waaier te verzekeren, zou het DNA-steekproefvolume ≥ 50 μL moeten zijn

6. Vóór het experiment, neem de magnetische parels van de ijskast en verwarm hen v3o3or gebruik aan kamertemperatuur meer dan 20 minuten

Protocollen

De grootteselectie van DNA versplintert Groter dan een Gespecificeerde Grootte (enig-Opgeruimde Selectie)

1. Bereid DNA-50 μL steekproef in een aangewezen centrifugebuis voor.

2. Voeg een bepaald volume van de opnieuw uitgestelde GDSPure-Selectie Magbeads van DNA volgens de 1st verhouding van de Pareltoevoeging in Lijst 1 aan de steekproef toe. Blaas zacht met een pipet voor 10 keer (of draaikolk voor jaren '30). Broed steekproeven voor 5 min uit bij kamertemperatuur.

Bijvoorbeeld, om alle fragmenten te selecteren groter dan 250 bp in de steekproef, voeg 40 μL (0.80X) magnetische parelopschorting toe.

3. Plaats de buis op een aangewezen magnetisch rek om de parels van de bovendrijvende substantie te scheiden. Wanneer de oplossing duidelijk is, verwijder en verwerp zorgvuldig de bovendrijvende substantie met een pipet (verwerp geen parels).

4. Voeg 200 μl van vers voorbereidingen getroffen van 80% ethylalcohol aan de buis toe terwijl in het magnetische rek. Broed bij kamertemperatuur uit voor jaren '30, en zorgvuldig verwijder en verwerp dan de bovendrijvende substantie (stoor geen parels).

5. Herhaal eens Stap 4 voor een totaal van twee wassen.

Nota: Ben zeker om al zichtbare vloeistof na de tweede was te verwijderen.

6. Droog de parels aan de lucht tot de oppervlakte van de magnetische parels geen duidelijke glans heeft terwijl de buis op het magnetische rek met het open deksel is.

Nota: niet overdry de parels, kan dit in lagere terugwinning van DNA resulteren. Wanneer de parels beginnen te barsten, zijn zij te droog.

7. Verwijder de buis uit het magnetische rek. Was het DNA-doel van de parels in nuclease-vrij water 30-40 μl of TE Buffer uit. Mengeling goed door boven en beneden minstens 10 keer of op een draaikolkmixer voor jaren '30 pipetting. Broed voor 3-5 min uit bij kamertemperatuur.

8. Plaats de buis op het magnetische rek. Na 5 min (of wanneer de oplossing) duidelijk is, breng de bovendrijvende substantie naar een nieuwe buis over. De selectie wordt voltooid, en geselecteerde DNA kan voor verdere experimenten worden gebruikt of bij -20°C lange tijd worden opgeslagen.

Grootteselectie van DNA-Fragmenten in Specifieke Grootteintervallen (Tweezijdige Selectie)

1. Bereid DNA-50 μL steekproef in een aangewezen centrifugebuis voor en etiketteer het als A.

2. Toevoeg een bepaald volume van de opnieuw uitgestelde GDSPure-Selectie Magbeads van DNA volgens de 1st verhouding van de Pareltoevoeging in Lijst 1 aan de buis A. Blaas zacht met een pipet voor 10 keer (of draaikolk voor jaren '30). Broed steekproeven voor 5 min uit bij kamertemperatuur.

Bijvoorbeeld, om fragmenten over 250 bp in de steekproef te selecteren, voeg 40 μL (0.80X) magnetische parelopschorting toe.

• Plaats de buis A op een aangewezen magnetisch rek om de parels van de bovendrijvende substantie te scheiden. Wanneer de oplossing duidelijk is, verwijder zorgvuldig de bovendrijvende substantie aan een nieuwe buis en etiketteer het als parels van B. Discard.

4. Toevoeg een bepaald volume van magnetische parelopschorting volgens de 2de verhouding van de Pareltoevoeging in Lijst 1 aan de buis B. Blaas zacht met een pipet voor 10 keer (of draaikolk voor jaren '30). Broed steekproeven voor 5 min uit bij kamertemperatuur.

Bijvoorbeeld, om fragmenten over 250 bp in de steekproef te selecteren, voeg 10 μL (0.20X) magnetische parelopschorting toe.

5. Plaats de buis B op magnetisch rek. Wanneer de oplossing duidelijk is, verwijder en verwerp zorgvuldig de bovendrijvende substantie.

6. Voeg 200 μl van vers voorbereidingen getroffen van 80% ethylalcohol aan de buis B toe terwijl in het magnetische rek. Broed bij kamertemperatuur uit voor jaren '30, en zorgvuldig verwijder en verwerp dan de bovendrijvende substantie (stoor geen parels).

7. Herhaal eens Stap 6 voor een totaal van twee wassen.

Nota: Ben zeker om al zichtbare vloeistof na de tweede was te verwijderen.

8. Droog de parels aan de lucht tot de oppervlakte van de magnetische parels geen duidelijke glans heeft terwijl de buis op het magnetische rek met het open deksel is.

Nota: niet overdry de parels, kan dit in lagere terugwinning van DNA resulteren. Wanneer de parels beginnen te barsten, zijn zij te droog.

9. Verwijder de buis B uit het magnetische rek. Was het DNA-doel van de parels in nuclease-vrij water 30-40 μl of TE Buffer uit. Mengeling goed door boven en beneden minstens 10 keer of op een draaikolkmixer voor jaren '30 pipetting. Broed voor 3-5 min uit bij kamertemperatuur.

10. Plaats de buis B op het magnetische rek. Na 5 min (of wanneer de oplossing) duidelijk is, breng de bovendrijvende substantie naar een nieuwe buis over. De selectie wordt voltooid, en geselecteerde DNA kan voor verdere experimenten worden gebruikt of bij -20°C lange tijd worden opgeslagen.

Lijst 1: Geadviseerde Voorwaarden voor Grootteselectie

Nota's

1. Gelieve te lezen zorgvuldig v3o3or gebruik de instructie en te werk volgens de instructies.

2. De ethylalcohol in de centrifugebuis zo ver mogelijk vóór elution moeten zou worden verwijderd om elution efficiency te verzekeren.

3. Eluent het volume kan volgens de experimentele vereisten, maar niet minder dan 20 μL worden aangepast.

4. De magnetische parels zouden centrifugeren, het bevriezen en ander verrichtingen moeten vermijden. V3o3or gebruik, kan de parelsopschorting volledig door draaikolk en andere methodes worden gemengd, en meer dan 20 minuten worden geplaatst om aan kamertemperatuur te verwarmen.

5. Vermijd het vloeibare hangen op de buisdekking tijdens draaikolk en het pipetting van verrichting om het DNA-verlies te verminderen.
 
GDSBio is een high-tech bedrijf concentreerde zich op de ontwikkeling, de productie en de marketing van de wetenschapsproducten van het kwaliteitsleven. Het bedrijf heeft een volledige productregel, met PCR technologie die als kern, zich op gewone PCR, fluorescente kwantitatieve PCR, NGS-bibliotheekbouw, nucleic zuurelektroforese en andere moleculaire biologietechnologieën concentreren, en moleculaire wetenschappelijke onderzoekreagentia, moleculaire kenmerkende grondstoffen in vitro, nucleic zuurextractie en opsporingsreagentia en andere producten ontwikkeld.